质粒载体如何构建,质粒构建的引物是什么
网友回答
你的质粒载如果是克隆型的,那么必须有:复制起始和终止位点、多克隆位点、标记位点、分子量小、易分离等特点。如果是表达型的则必须有:转录起始位点,也就是要有启动子和终止子等。
网友回答
如果是需要把一个特定的基因片段扩增后,插入到载体上构建质粒,则要根据载体上多克隆位点带有的酶切位点,在自己的目标基因片段上下游都分别设计一段序列,并在设计的序列中引入载体上的酶切位点。这个时候设计出来,用于完成PCR扩增,并能够在目标序列上下游都引入酶切位点的两段序列就叫做质粒构建引物。
这样扩增获得的目标片段两端就带有了酶切位点,经过酶切后,与同样经过酶切的载体就可以连到一起,形成环状,完成质粒的构建。