缓冲液是什么,TE缓冲液的配制方法

发布时间:2020-07-10 09:09:38

缓冲液是什么,TE缓冲液的配制方法

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缓冲液一般指平衡溶液。
  是一种能对溶液酸度起稳定作用的溶液。
  能使溶液酸碱性维持在一定范围内。
  缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。PH缓冲系统对维持生物的正常pH值,正常生理环境起重要作用。

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配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中
  1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml
  0.5M EDTA PH=8.0 1ml
  向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.
  1×TE Buffer
  组成浓度:10mMTris-HCl1mM EDTA PH=8.0
  配制量:500ml
  扩展资料
  TE缓冲溶液(Tris-EDTA buffer solution)
  在生化研究工作中,常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到我们工作的成效。如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大,会使酶活性下降甚至完全失活。所以我们要学会配制缓冲溶液。
  由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。
  硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。
  柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。
  磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
  三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris一缓冲液,在4℃时是8.4,在37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下,缓冲能力差。
  参考资料:TE缓冲液的百度百科
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