报告基因和标记基因的区别是什么,基因工程中的标记基因

网友回答

标记基因通常用来检验重组DNA载体转化成功与否，或者检测目的基因在植物细胞或组织中的定位。常用的标记基因是一些抗生素抗性基因，如卡那霉素抗性基因、潮霉素标记基因等。
　　如：某种具有氨苄抗性基因质粒（该基因即可认为标记基因），与外源DNA片段组合形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有氨苄抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。当用选择培养基（比如含有氨苄的培养基），来培养受体细胞时，能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源DNA，标记基因就起作用了。
　　作为报告基因，在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件：(1)已被克隆和全序列已测定；(2)表达产物在受体细胞中不存在，即无背景，在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物；(3)其表达产物能进行定量测定。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、荧光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、分泌型碱性磷酸酶基因(seap)、绿色荧光蛋白基因(gfp)等。
　　如：
　　 绿色荧光蛋白(gfp)基因。绿色荧光蛋白来源于海洋生物水母，其基因可在异源组织中表达并产生光，GFP
　　Cdnad开放阅读框架长度约740bp，编码238个氨基酸残基，其肽链内部第65-67位丝氨酸-脱氢酪氨酸-甘氨酸通过自身环化和氧化形成一个发色基因，在长紫外波长或蓝光照射下发出绿色荧光。转染后的细胞可在荧光显微镜或流式细胞仪(FACS)中直接观察基因的表达。

网友回答

因为，没导入外源DNA的话，也就没导入标记基因（和目标DNA同质粒），没有导入的标记基因的成功表达大肠杆菌就没有青霉素抗性，就无法在含青霉素的选择培养基下生存（青霉素是一种抗生素，细菌怕怕）。
　　--------分割线，下面是小梳理，解释上面大概说明白了吧，是不是卡在哪里勒--------
　　这里注意的是证明是外源DNA的成功导入，验证转基因是否成功分3个阶段
　　是否成功导入
　　是否成功转录
　　是否成功表达
　　而筛选方法又分为3个层面
　　分子层面
　　细胞层面
　　个体层面
　　现在整理一下方法（后注有 阶段-层面）：
　　标记基因（1-2）
　　核酸分子杂交法（DNA-DNA是1-1；RNA-DNA是2-1）
　　抗原抗体杂交法（3-1）
　　个体筛选（比如在盐地上种研发的抗盐植株）（3-3）
　　细胞在选择培养基上筛选（这里用的是目标基因不是标记基因的表达物）（3-2）
　　可能还有，可以继续补充