western blot中,封闭液封闭完成后,需要用PBS或PBST洗,PBS和PBST分别是什么东西
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一抗孵育完成后洗膜是为了洗掉未和膜结合的抗体,而不是磷酸盐。只有洗干净非特异性结合在膜上的一抗,加二抗时才不会因非特异结合而呈现很重的背景。至于是内使用PBS(T)还是TBS(T),这要具体看你的二抗容种类。PBS不适合AP系列,PBS/TBSS适合AP和HRP体系。另外,做磷酸化蛋白的WB,PBS不合适.
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聚丁二酸丁二醇酯( PBS)
聚丁二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(PBST)