培养细菌和真菌的一般步骤按先后顺序排列是：③①②④→　→　→　①高温灭菌②接种③配制含有营养物质的培养基④恒温培养

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解析：细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物，因此首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制，然后把培养基和所有用具进行高温灭菌，以防杂菌对实验的干扰，为防止高温杀死细菌、真菌，要等冷却后，在进行接种，接种后放在温暖的地方进行恒温培养，注意：定期观察并详细记录实验现象。