蛋白类药物检测方法有哪些?需要用到常用仪器都有什么?

发布时间:2019-08-07 04:53:40

蛋白类药物检测方法有哪些?需要用到常用仪器都有什么?

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高效液相色谱系统等度

 1、样品前处理

  称取试样0.5-1.0 g与10 mL具塞离心管中,加入3.0 mL温水超声,再加入7.0 mL乙腈涡旋,以 6000r/min转速于-10℃冷冻离心20 min,吸取清液5.0 mL,氮气吹干,用1.0 mL 70%乙腈溶液复溶,过0.45 μm有机相滤膜。

  2、色谱分析条件

  色谱柱:C18液相柱(250 mm × 4.6 mm, 5 μm)

  进样量:10 μL

  流速:1.0 mL/min

  检测波长:203 nm

  流动相:A为0.2 mmol/L乙酸铵(pH 4.0);B为乙腈

  梯度洗脱程序:

时间A组分含量B组分含量0-3.5 min70%30%3.5-4.0 min70%-10%30%-90%4.0-8.0 min10%90%8.0-10 min10%-0%90%-100%

  3、 质谱条件

  电喷雾电离ESI正离子模式,电喷雾电压:4000 V,鞘气压力:30 psi,辅助气压力:5 psi,扫描模式MRM

  分析对照品

产品编号中文名称CAS包装452731尿素57-13-6100 g571211缩二脲108-19-05 g129306双氰胺461-58-55 g

  耗材与试剂

产品编号产品名称包装531036乙酸, 99.8%1 L944664乙酸铵, 98%100 g932537乙腈 [LC-MS]4 L965057水 [LC-MS]4 LS02302C18液相柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)       2013年5月1日前购买可参与买一送一活动1 支ZTLMGL-4.1针筒式滤膜过滤器 Ф13 0.2 μm(有机)100 片/包WKLM-3微孔滤膜 Ф50 0.45 μm(水相)100 片/包901275瓶口分配器(5.0-50.0 mL)1 支958945单道手动可调移液器(100-1000 μL)1 支928429磁力搅拌器(数显、加热、不锈钢)1 台5182-0553螺纹透明样品瓶(蓝色螺纹盖,PTFE红色硅橡隔垫)100 个/包5182-0728聚丙烯螺纹瓶盖(无隔垫)100 个/包5183-4759高级绿色隔垫(带预穿孔)50 个/包CER-001-11.5 mL标准毛细储存瓶1 个

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