最近重复做了三次MTT,每次除了细胞接种密度不一样,其他的如配药等操作尽最大能力的保持一致,但最终三次MTT的结果差别很大。差别主要在于同一药物浓度对细胞的诱导凋亡率不一样,比如说10umol/L的药物在第一次MTT时24小时诱导凋亡率是40%,而第二次加大细胞接种密度时变成74%,我在怀疑是不是细胞接种密度越大,凋亡率就越小呢?请各位不吝赐教!
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你的解释是有道理的。处于对数生长期的细胞对药物是最敏感的,而对数生长期的细胞就是似满非满,长得太满的细胞肯定已过对数生长期,你要对接种的细胞浓度摸索一下,细胞生长的速度与达到对数生长期的时间有关,不同浓度达到对数生长期的时间不同,也就是说,你用药的时间与接种的细胞浓度有关。另外,及时给细胞换液,对细胞的生长也很重要。一般隔一天要换一次页,除非细胞特别少。祝你成功!