发布时间:2019-08-07 04:15:06
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BCA蛋白浓度检测是一个实验,是根据吸光值可以推算出蛋白浓度.碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
BCA法与Bradford法蛋白检测一道,并列成为当今世界上最为常用的两种蛋白浓度检测方法。BCA法灵敏度高,可准确定量 1~2000 μg/ml 的蛋白样品。BCA法受温度和时间影响较大,需准确定时、定温(如37℃放置30分钟),以保证蛋白的准确定量。