请问BCA法测蛋白浓度的灵敏度如何?能检测到多低的浓度范围哪?

发布时间:2019-08-07 04:15:06

谢谢大家,越相信越好!

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BCA蛋白浓度检测是一个实验,是根据吸光值可以推算出蛋白浓度.碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

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 BCA是测总蛋白含量的最常用方法,具体原理网上很多,可以去搜搜看,很简单。高浓度蛋白可以试着梯度稀释后检测,最好在标准曲线中间位置,低浓度就需要灵敏度高一些的试剂盒了,我们上次用的是上海炎熙生物的一款增强型BCA试剂盒。他采用了浓缩型试剂配方,提高了孵育时间和温度,因此可以增加样品体积和增加光吸收值,从而能够检测更低浓度的蛋白,检测范围可低至0.5到20 μg/ml。你可以试试。

BCA法与Bradford法蛋白检测一道,并列成为当今世界上最为常用的两种蛋白浓度检测方法。BCA法灵敏度高,可准确定量 1~2000 μg/ml 的蛋白样品。BCA法受温度和时间影响较大,需准确定时、定温(如37℃放置30分钟),以保证蛋白的准确定量。

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