题目类型:[问答题] 以硝酸纤维素滤膜(nitrocellulosefiltermembrane)作为杂交的固相支持物具有哪些优缺点?
网友回答
参考答案: 优点: (1)硝酸纤维素滤膜具有较强的吸附单链 DNA和 RNA的能力,特别在高盐溶液中,结合能力达到 80—100μg/cm2 。 (2)杂交信号本底较低。由于硝酸纤维素滤膜非特异性吸附蛋白质的能力较弱,因此特别适合于那些涉及蛋白质作用(如抗体和酶等)的非放射性标记探针的杂交体系。 不足: (1)它同DNA的结合仅是靠疏水性的相互作用,所以并不十分牢固,在洗膜时,特别是在高温条件下洗膜,DNA会慢慢脱落,因而影响杂交效率。 (2)硝酸纤维素滤膜容易碎裂,操作不方便。 (3)硝酸纤维素滤膜在低盐浓度下同 DNA结合的能力不强,因此不适宜电转移印迹法。 (4)硝酸纤维素滤膜对于小分子量的 DNA片段(特别是小于 200bp 的DNA片段)结合能力不强。
试题难度:★★☆
参考解析: