real-time PCR可以直接以细菌的DNA为模板进行定量分析吗?还是real-time PCR 是针对RNA的啊? 生物
网友回答
【答案】 当然可以.
real time PCR最终是对PCR的模板做定量,只是现在较多用于基因表达差异比较与分析,也就是mRNA的定量（RT-qPCR）,所以给生手的影响是用于RNA.但要注意的是,即使是mRNA,也有逆转录的过程,也就是先逆转录cDNA,这才是rt-pcr真正意义的模板,分析的是cDNA的量,进而反应mRNA的量.
直接用DNA来做,那就更可以了,反应的是模板DNA量的差异.比如对某些DNA病毒,就可以直接以病毒DNA为模板来RT-pcr,你用菌的DNA有何不可. 追问： 就是DNA ,RNA 其追究的深层次意义不一样。DNA直接作为模板就是定量物质中跟引物有关的DNA的定量；而RNA则是定量所需相关基因表达有关的DNA的定量？？？ 追答： 你这么一说，我明白了，开始我也疑问你对细菌的DNA定量有什么意义。 照你的实验意图，你还是要做RT-qPCR，对相关RNA定量，看相关基因是否表达及其水平。