【过氧化氢酶测定】关于过氧化氢酶活性测定问题急急急!!!下面是我用的...

关于过氧化氢酶活性测定问题，急急急！！！下面是我用的测定过氧化氢酶活性方法：对于这个实验方案，我有两个不明白的地方：1.计算公式的1.7是不是随着高锰酸钾标准液浓度的变化而变化，比如说我测定前标定的高锰酸钾标准液浓度为0.09mol/L，那我这个系数就不是1.7了，是不是得重新计算？？？？2.在这个实验中每次测定前要求标定过氧化氢标准溶液的浓度，我不明白的是为什么要标定，在计算公式或者换算中也没有用到过氧化氢标准溶液的浓度，为什么要标定呢，如果不标定对结果有什么影响？？？？过氧化氢酶活性测定（高锰酸钾滴定法）一、原理过氧化氢酶（catalase）属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。在反应系统中加入一定量（反应过量）的过氧化氢溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的过氧化氢。即可求出消耗的H2O2的量。二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：小麦叶片（二）仪器设备：1. 研钵；2. 三角瓶；3. 酸式滴定管；4. 恒温水浴；5. 容量瓶。（三）试剂：1. 10%H2SO4；2. 0.2 mol/L pH7.8磷酸缓冲液；3. 0.1mol/L 高锰酸钾标准液称：取KMnO4（AR）3.1605g，用新煮沸冷却蒸馏水配制成1000ml，再用0.1mol/L 草酸溶液标定；4. 0.1mol/L H2O2市售30%H2O2大约等于17.6mol/L，取30%H2O2溶液5.68ml，稀释至1000ml，用标准0.1mol/L KMnO4溶液（在酸性条件下）进行标定；5. 0.1mol/L 草酸：称取优级纯H2C2O4.2H2O 12.607g，用蒸馏水溶解后，定容至1000ml。三、实验步骤（一）酶液提取：取小麦叶片2.5g加入pH7.8的磷酸缓冲溶液少量，研磨成匀浆，转移至25ml容量瓶中，用该缓冲液冲洗研钵，并将冲洗液转至容量瓶中，用同一缓冲液定容，4000rpm离心15min，上清液即为过氧化氢酶的粗提液。（二）取50ml三角瓶4个（两个测定，另两个为对照），测定瓶加入酶液2.5ml，对照加煮死酶液2.5ml，再加入2.5ml 0.1mol/L H2O2，同时计时，于30℃恒温水浴中保温10min，立即加入10%H2SO42.5ml。用0.1mol/L KMnO4标准溶液滴定，至出现粉红色（在30min内不消失）为终点。四、结果酶活性用每g鲜重样品1min内分解H2O2的mg数表示：过氧化氢酶活性（H2O2mg/g/min）＝（A－B）×VT×1.7/(W×VS×t)式中：A对照KMnO4滴定ml数；B酶反应后KMnO4滴定ml数；VT提取酶液总量（ml）；VS反应时所用酶液量（ml）；W样品鲜重（g）；t反应时间（min）；1.7ml0.1mol/L KMnO4相当于1.7mgH2O2。希望做过或是明白这个实验的专业人士回答，万分感谢！！！