细胞冻存的问题我在4度放了半个小时之后,然后在-20度放了一个半小时,本来是要求半个小时的,结果忘了时间了,就在-20度放了一个半小时,然后又放在-70度的.请问我的细胞如果在复苏的话还能存活吗?我们这实验室以前的步骤都要求缓慢冷冻，快速复苏。-4度半小时，-20度半小时，-80度过夜，然后液氮。所以这个步骤是没有错的。因为师兄师姐从来没有过差错。错就错在我在-20度放了放了一个半小时，
网友回答
冻存细胞,应用液氮急冻,避免缓慢降温形成晶体破坏细胞结构,你这个做法,很匪夷所思.
别等复苏了,现在赶紧拿出来活化,重新保存吧
对你的补充：我拿北京大学生命科学院国家重点实验室的名义打赌,你那些师兄师姐全是错的,正好弄反了.正确的步骤是速冻、慢融——液氮速冻,冰上解冻.
你们那做法,会有存活的细胞,但是一定比正确步骤少了很多,不信你试试.
======以下答案可供参考======
供参考答案1:
你的这个程序看起来不太对劲啊，细胞应该急冻于液氮，这样可以尽可能减少细胞内结晶冰的出现破坏结构。怎么放-20度？
我估计你细胞的存活率比较低。
供参考答案2:
会有一定的影响，但是影响不大，缓慢冻的过程就是逐渐使水凝华的过程，水由液态变为固态时体积会增大，这样对你冻的细胞就会产生一定的力，会对细胞有一定的影响，不过毕竟是细胞而不是蛋白质所以个人认为没太大的影响。