pcr扩增时,引物浓度一般需要多大?加多少? 化学
网友回答
【答案】 通常拿到的引物有1 OD或者2.5 OD等等
拿1 OD的引物来说
合成后通常有个说明书
1 0D的引物物质的量大概是在5 nmol
那么我们通常是加入500 uL的水稀释
这个时候引物的浓度是10 umol/L
也就是你用的浓度
如果取1 uL引物的话
物质的量是 10 umol/L x 1 uL = 10 x 10的负6次方 umol = 10 pmol
一般而言25 uL的反应体系上下游引物各加入10 pmol,当然可以根据具体实验需要进行相应调整
关键就是看你一开始引物是怎么稀释的
然后慢慢换算就行了