下面是4种限制性核酸内切酶所识别的DNA分子序列和剪切位点图（↓表示剪切点、切出的断面为粘性末端）：限制性核酸内切酶1：——↓GATC—— 限制性核酸内切酶2：——CATG↓——限制性核酸内切酶3：——G↓GATCC—— 限制性核酸内切酶4：——CCGC↓GG下列叙述正确的是A.限制性核酸内切酶1和2切出的DNA片段可通过DNA连接酶拼接 B.限制性核酸内切酶1、2、4识别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成 C.在使用限制性核酸内切酶的同时还需要解旋酶 D.限制性核酸内切酶1和3切出的粘性末端相同
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D解析试题分析：由图可知：限制性核酸内切酶1和2切出的DNA片段的黏性末端不同，不可通过DNA连接酶拼接，但限制性核酸内切酶1和3切出的黏性末端相同。限制性核酸内切酶1、2识别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成，限制性核酸内切酶3、4识别的序列是由6个脱氧核苷酸组成。在使用限制性核酸内切酶时，不需要解旋酶。 故选D考点：本题考查限制酶的内容。
点评：限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。DNA经不同限制酶切割后，只有在形成相同的黏性末端时，才可以通过DNA连接酶拼接。